北大生命科學(xué)學(xué)院劉東課題組在CRISPR-Cas9基因組編輯技術(shù)應(yīng)用上取得突破性進(jìn)展

時(shí)間：2014-06-10 10:41  作者：  來源：北京大學(xué)新聞網(wǎng)

　　北大生命科學(xué)學(xué)院劉東課題組應(yīng)用CRISPR-Cas9基因組編輯（genome editing）技術(shù)，在模式生物線蟲中成功實(shí)現(xiàn)了不同類型的基因打靶：1、在性腺特異表達(dá)Cas9的轉(zhuǎn)基因線蟲中，通過飼喂基因靶點(diǎn)特異的gRNA或直接向線蟲性腺注射Cas9和gRNA（DNA或RNA），均獲得了可遺傳的突變體；2、在非性腺表達(dá)Cas9的轉(zhuǎn)基因線蟲中，通過飼喂基因特異的gRNA獲得了體細(xì)胞突變體；3、利用熱激蛋白基因啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的轉(zhuǎn)Cas9基因線蟲，該飼喂CRISPR-Cas9系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了不同發(fā)育時(shí)期的體細(xì)胞基因突變。飼喂CRISPR-Cas9系統(tǒng)可省時(shí)、高效地實(shí)現(xiàn)大規(guī)模特定基因定向敲除和突變體篩選，有潛力成為線蟲反向遺傳學(xué)研究的新型工具。本研究相關(guān)論文“Heritable/Conditional Genome Editing in C. elegans Using a CRISPR-Cas9 Feeding System”近日已在線發(fā)表在《細(xì)胞研究》雜志上。

 

建立線蟲CRISPER-CAS9飼喂系統(tǒng)并成功獲得突變體和組織特異性基因敲除個(gè)體

　　該研究成果有力推動(dòng)了劉東實(shí)驗(yàn)室“基因間區(qū)長(zhǎng)非編碼RNA的篩選和功能分析”課題的進(jìn)展，部分延續(xù)了前期非編碼RNA的工作（Liu et al., 2011. Cell Res. 21:1605-1618，劉東與樊啟昶老師共同指導(dǎo)完成）。博士研究生劉朋朋、隆例江和熊鍇為該研究論文的共同第一作者，劉東為通訊作者。本研究得到生物膜和膜生物工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、國(guó)家自然科學(xué)基金委、科技部和北京大學(xué)-清華大學(xué)生命聯(lián)合中心的資助。